Сравнительный анализ асептического введения и стабилизации in vitro разных типов эксплантов ясеня обыкновенного

О.А. Кудряшова (O.A. Kudryashova), А.В. Чалей (A.V. Chaley), А.В. Буй (A.V. Buy), Ю.Д. Луконина (U.D. Lukonina), Н.В. Водчиц (N.V. Vodchic), Т.А. Борисевич (T.A. Borisevich), А.А. Волотович (A.A. Volotovich)

Аннотация


В настоящей статье впервые приведены результаты применения 24–эпибрассинолида на этапе стабилизации in vitro регенерантов ясеня обыкновенного Fraxinus excelsior L., семенного происхождения. В работе использовали семена, собранные в 2016 году в Гомельской и Гродненской областях Республики Беларусь. Показано, что наиболее подходящим типом первичного экспланта ясеня обыкновенного для асептического введения в культуру in vitro являются изолированные зародыши. Для успешного асептического введения in vitro от 57–100% изолированных зародышей ясеня обыкновенного рекомендуется питательная, агаризованная сре-да Мурасиге и Скуга половинного состава без фитогормонов, с добавлением 20 г/л сахарозы, 9 г/л агар–агара, при рН=5,6. Для успешной стабилизации in vitro регенерантов ясеня обыкновенного можно рекомендовать питательную, агаризованную среду Андерсона, дополненную 1 мг/л зеати-на и 0,75 мг/л 24–эпибрассинолида, при этом у всех регенерантов ясеня обыкновенного формируются корни в количестве от 1–3 и длиной от 0,6–6,0 см, в зависимости от генотипа. For the first time in the world the results of application of 24–epibrassinolid in a stage of stabilization in vitro of european ash (Fraxinus excelsior L.) regenerants of seed origin are given in the present article. In work there are used the seeds collected in 2016 in the Gomel and Grodno regions of the Republic of Belarus. It is shown that the most suitable type of primary explants of european ash for aseptic introduction in vitro are the isolated germs. For successful aseptic in vitro introduction in amount of 57–100% of the european ash isolated germs is recommended the nutrient, agarized medium of half Murasige and Skoog’s compound without phytohormones, with addition of 20 g per liter of sucrose, of 9 g per liter of agar–agar, and of рН=5,6. For successful in vitro stabilization of the european ash regenerants is recommended the nutrient, agarized Anderson’s medium added with 1 mg per liter of zeatin and of 0,75 mg per liter of 24–epibrassinolid. At the same time, all of the european ash regenerants depending on a genotype, are formed roots in quantity from 1–3 and from 0,6–6,0 cm long.

Полный текст:

PDF

Литература


Штукин, С.С. Приоритетные типы лесных культур ясен обыкновенного в условиях Беларуси / С.С. Штукин, С.Г. Шауро // Лесное и охотничье хозяйство. – 2009. – № 1. – C. 17–22.

Микроразмножение и регенерация адвентивных побегов ясеня обыкновенного (Fraxinus excelsior L.) в культуре in vitro / И.И. Концевая, В.Е. Падутов, К.А. Шестибратов, В.Г. Лебедев // Проблемы лесоведения и лесоводства: сборник научных трудов Института леса НАН Беларуси, Гомель. – 2008. – Вып. 68. – С. 239–244.

Лебедев, В.Г. Эффективный способ получения посадочного материала ясеня обыкновенного in vitro / В.Г. Лебедев, К.А. Шестибратов // Вестник Московского государственного университета

леса. – Лесной вестник. – 2010. – № 3. – С. 112–118.

Kuusiene, S. Organogenesis of Fraxinus excelsior L. by isolated mature embryo culture / S. Kuusiene, R. Mockeliunaite // Acta Universitates Latviensis, Biology. – 2004. – Vol. 676. – p. 197–200

Chalupa, V. Micropropagation of hornbeam (Carpinus betulus L.) and ash (Fraxinus excelsior L.) / V. Chalupa // Biologia Plantarum. 1990. – Vol. 32. – p. 332–338.

Ridout M.S. Micropropagation of common ash (Fraxinus excelsior L.) / M.S. Ridout, N. Hammat // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. – 1992. – Vol. 31. – p. 67–74.

Hammat, N. Shoot initiation in the leaflet axils of compound leaves of micropropagated shoots of juvenile and mature common ash (Fraxinus excelsior L.). / N. Hammat // Journal of Experimental Botany. – 1994. – Vol. 45.– p. 173–193.

Effect of medium on in vitro germination of embryos of Fraxinus excelsior L. / I. Iliev, A. Scaltsoiyannes, M. Tsaktsira, P. Tsoulpha, D. Dancheva // Muzeul Olteniei Craiova. Oltenia. Studii şi comunicări. Ştiinţele Naturii. – 2010. – Vol. 26. – №1. – p. 34–38.

Rapid seedling obtaining from European ash species Fraxinus excelsior L. and Fraxinus angustifolia Vahl. / C. Raquin, B. Jung–Muller, J. Dufour, N. Frascaria–Lacoste // Annals of Forest Science. – 2002. – Vol. 59. – p. 219–224.

Лебедев, В.Г. Эффективный способ получения посадочного материала ясеня обыкновенного in vitro / В.Г. Лебедев, К.А. Шестибратов // Вестник Московского государственного университета леса. – Лесной вестник. – 2010. – № 3. – С. 112–118.

Trigiano, R.N. Plant tissue culture concepts and laboratory exercises / R.N. Trigiano, D.J. Gray. – US/MA, CRC Press LLC., 1999–2000. – 454 p.

Доспехов, Б.А. Методика полевого опыта / Б.А. Доспехов. – М.: Агропромиздат, 1985. – 350 с.

Боровиков, В.П. STATISTICA: Искусство анализа данных на компьютере / В.П. Боровиков. – Спб: Питер, 2001. – 688 с.

Кудряшова, О.А. Физиолого–биохимические особенности действия брассиностероидов на процессы микроклонального размножения голубики высокорослой Vaccinium corymbosum L.: диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.01.05. – физиология и биохимия растений / О.А. Кудряшова. – Минск, 2015. – 175 с.

Shtukin S.S., Shauro S.G. Prioritetnye tipy lesnykh kul'tur iasenia obyknovennogo v usloviiakh Belarusi [Main types of forest cultures of European ash in Belarus]. Lesnoe i okhotnich'e khoziaistvo, 2009, iss. 1, pp. 17–22 (In Russian).

Kontsevaia I.I., Padutov V.E., Shestibratov K.A., Lebedev V.G. Mikrorazmnozhenie i regeneratsiia adventivnykh pobegov iasenia obyknovennogo (Fraxinus excelsior L.) v kul'ture in vitro [Micropropagation and regeneration of European ash adventitious shoots of (Fraxinus excelsior L.) in vitro]. Problemy lesovedeniia i lesovodstva. 2008, iss. 68, pp. 239–244 (In Russian).

Lebedev V.G., Shestibratov K.A. Effektivnyi sposob polucheniia posadochnogo materiala iasenia obyknovennogo in vitro [An effective way of obtaining European ash planting material in vitro]. Vestnik

Moskovskogo gosudarstvennogo universiteta lesa – Lesnoi vestnik. 2010, no. 3, pp. 112–118 (In Russian).

Kuusiene S., Mockeliunaite R. Organogenesis of Fraxinus excelsior L. by isolated mature embryo culture. Acta Universitates Latviensis, Biology, 2004, Vol. 676, pp. 197–200

Chalupa V. Micropropagation of hornbeam (Carpinus betulus L.) and ash (Fraxinus excelsior L.). Biologia Plantarum, 1990, Vol. 32, pp. 332–338

Ridout M.S., Hammat N. Micropropagation of common ash (Fraxinus excelsior L.). Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 1992, Vol. 31, pp. 67–74

Hammat N. Shoot initiation in the leaflet axils of compound leaves of micropropagated shoots of juvenile and mature common ash (Fraxinus excelsior L.). Journal of Experimental Botany, 1994, Vol. 45, pp. 173–193

Iliev I., Scaltsoiyannes A., Tsaktsira M., Tsoulpha P., Dancheva, D. Effect of medium on in vitro germination of embryos of Fraxinus excelsior L. Muzeul Olteniei Craiova. Oltenia. Studii şi comunicări. Ştiinţele Naturii, 2010, Vol. 26, no. 1, pp. 34–38

Raquin C., Jung–Muller B., Dufour J., Frascaria–Lacoste N. Rapid seedling obtaining from European ash species Fraxinus excelsior L. and Fraxinus angustifolia Vahl. Annals of Forest Science, 2002, Vol. 59, pp. 219–224.

Lebedev V.G., Shestibratov K.A. Effektivnyi sposob polucheniia posadochnogo materiala iasenia obyknovennogo in vitro.[ An effective way of obtaining European ash planting material in vitro] Vestnik

Moskovskogo gosudarstvennogo universiteta lesa – Lesnoi vestnik, 2010, no. 3, pp. 112–118 (in Russian).

Trigiano R.N., Gray D.J. Plant tissue culture concepts and laboratory exercises. US/MA, CRC Press LLC., 1999–2000, 454 p.

Dospekhov B.A. Metodika polevogo opyta [Methodology of field experience]. Moscow, Agropromizdat Pabl., 1985, 350 p. (In Russian)

Borovikov V.P. STATISTICA: Iskusstvo analiza dannykh na komp'iutere [STATISTICA. The art of analyzing data on a computer]. Saint Petersburg, 2001, 688 p. (In Russian)

Kudriashova O.A. Fiziologo–biokhimicheskie osobennosti deistviia brassinosteroidov na protsessy mikroklonal'nogo razmnozheniia golubiki vysokorosloi Vaccinium corymbosum L. [Physiological and biochemical features of brassinosteroids activity on the processes of microclonal reproduction of tall blueberry Vaccinium corymbosum L]. Ph. D. thesis. Minsk, 2015. 175 p. (In Russian)