Сравнительный анализ способов асептического введения в культуру in vitro растений Melittis sarmatica Klok
Abstract
Разработаны способы стерилизации и введения в культуру in vitro редкого пряноароматического растения Белорусской флоры Melittis sarmatica Klok. Материалом для введения служили семена и черенки с пазушными почками. В качестве основного стерилизующего агента для семян использовали 0,1%-ный раствор нитрата серебра, для черенков – 0,1%-ный раствор диацида. Изучено влияние 6-бензиламинопурина (6-БАП), 24-эпибрассинолида (ЭБ), их сочетаний и концентраций на всхожесть in vitro семян растений Melittis sarmatica. Наиболее высокие показатели по стерильности и всхожести семян наблюдались при сочетании 6-БАП и ЭБ в концентрациях по 0,5 мг/л (всхожесть 3–5%), при добавлении в среду только 0,5–1,0 мг/л 6-БАП (2–6%), или только 0,1–1,0 мг/л ЭБ (1–2%). Наиболее высокие результаты по стерилизации (72,6%), регенерации (62,7%) и укореняемости (28,7%) стерильных черенков были получены при семиминутной обработке 0,1% раствором диацида. Ключевые слова: Melittis sarmatica, in vitro, стерилизация, эксплант, нитрат серебра, диацид, бензиламинопурин, эпибрассинолид. There were developed the methods of sterilization and introduction in vitro of a rare aromatic plants of the Belarusian flora of Melittis sarmatica Klok. The seeds and cuttings with axillary buds were used as a material for introduction in vitro culture. As the main sterilizing agents there were used the 0.1% solution of silver nitrate and the 0.1% solution of the diacid. Influence of a 6-benzilaminopurin (6-BAP), 24-epibrassinolid (EB), their combinations and concentration on in vitro viability and germination of plant seeds Melittis sarmatica in vitro is studied. The highest rates on sterility and viability of seeds were ob-served at a combination 6-BAP and EB in concentration on 0.5 mg/l (viability of 3-5%), at addition on medium only of 0.5-1.0 mg/l 6-BAP (viability of 2–6%), or only of 0.1–1.0 mg/l of EB (viability of 1–2%). The most high influence on sterilization (72.6%), regeneration (62.7%) and rooting (28.7%) of sterile cuttings have been received at seven-minute processing of 0.1% solution of the diacid. Key words: Melittis sarmatica, in vitro, sterilization, explant, silver nitrate, the diacid, benzylaminopurine, epibrassinolide.References
Edison, S. Biodiversity of Tropical Tuber Crops in India / S. Edison [et al.] // National Biodiversity Authority Chennai, TamilNadu, India, 2006. – 60 p.
Gurib-Fakim, A. Medicinal plants: traditions of yesterday and drugs of tomorrow / А. Gurib-Fakim // Molecular Aspects of Medicine. – 2006. – vol. 27. – P. 1–93.
Об установлении списков редких и находящихся под угрозой исчезновения на территории Республики Беларусь видов диких животных и дикорастущих растений, включаемых в Красную
книгу Республики Беларусь – Постановление Министерства природных ресурсов и охраны окружающей среды Республики Беларусь, 9 июня 2014 г., № 26 // Нац. реестр правовых актов Респ.
Беларусь. – 2014. – № 28. – С. 173-189.
Bączek, K. In vitro propagation of bastard balm (Melittis melissophyllum L.) / K. Bączek [et al.] // Herba Pol. – 2015. – Vol. 61(3). – Р. 67–76.
Сахвон, Е.В. Оздоровление растений Melittis sarmatica в культуре in vitro / Е.В. Сахвон, Т.И. Фоменко // Проблемы сохранения биологического разнообразия и использования биологических
ресурсов: материалы III Междунар. Конф., посвяще. 110-летию со дня рожд. акад. Н.В. Смольского, Минск, 7−9 октября 2015 г.: в 2 ч. /Нац. акад. наук Беларуси [и др.]; редкол.: В.В. Титок [и др.]. – Минск : Конфидо, 2015. – С. 184–186.
Ветчинкина, Е.М. Биологические особенности культивирования in vitro семян и зародышей редких видов растений: автореф. дисс. … канд. биол. наук: 03.02.01 / Е.М. Ветчинкина; ГБС им. Н.В. Цицина РАН. – М., 2010. – 170 с.
Гречаный, И.А. Большой иллюстрированный справочник лекарственных трав и растений / И.А. Гречаный. – Харьков : Книжный клуб «Клуб семейного досуга», 2015. – 544 с.
Природа Беларуси: энциклопедия. В 3 т. Т.3. Растения, грибы, животные / редкол.: В.Ю. Александров [и др..]. – Минск: Беларус. Энцыкл. Iмя П.Броукi, 2014. – 464 с.
Kaurinovic, B. Antioxidant аctivities of Melittis melissophyllum L. (Lamiaceae) / B. Kaurinovic [et al.] // Molecules. – 2011. – Vol. – 16, Р. 3152–3167.
Skrzypczak-Pietraszek, E. Chemical profile and seasonal variation of phenolic acid content in bastard balm (Melittis melissophyllum L., Lamiaceae) / E. Skrzypczak-Pietraszek, J. Pietraszek // Journal of pharmaceutical and biomedical analysis. – July 2012. – vol. 66. – P. 154–161.
Центральный ботанический сад НАН Беларуси: сохранение, изучение и использование биоразнообразия мировой флоры / В. В. Титок [и др.] ; под ред. В. В. Титка, В. Н. Решетникова. – Минск : Беларус. навука, 2012. – 345 с.
Корзун О.С. Лекарственные растения: пособие для студ. высш. учеб. завед. / О.С. Корзун, Н.А. Дуктова; под. ред. Н. Н. Пьянусова. – Горки БГСХ, 2013. – 262 с.
Лознухо, И.В. Особенности кадила сарматского (Melittis sarmatica Klok.) в условиях культуры / И.В. Лознухо, Т.К. Гавриленко, В.С. Линник // Пряно-ароматические и лекарственные растения: перспективы интродукции и использования: материалы Междунар. конф., Минск, 31 мая–2 июня 1999 г. / НАН Беларуси, ЦБС НАН Беларуси, Минсельхозпрод РБ, Концерн «Белбиофарм»; ред. В.Н. Решетников. – Минск, 1999. – С. 79-80.
Красная книга Республики Беларусь: Редкие и находящиеся под угрозой исчезновения виды дикорастущих растений / Мин-во природн. ресурсов и охраны окруж. среды РБ; редкол.: Л.И. Хоружик [и др.]. – Минск: Белорусская энциклопедия им. Петруся Бровки, 2005. – 456 с.
Кухарева, Л.В. Особенности размножения кадила сарматского (Melittis Sarmatica Klock.) при интродукции / Л.В. Кухарева, Т.М. Новичкова, А.В. Эльяшевич // Пряно-ароматические и лекарственные растения: перспективы интродукции и использования: материалы Междунар. Конф., Минск, 31 мая–2 июня 1999 г. / НАН Беларуси, ЦБС НАН Беларуси, Минсельхозпрод РБ, Концерн «Белбиофарм»; ред.. В.Н. Решетников. – Минск, 1999. – С. 66-67.
Skrzypczak, E. The tissue culture and chemical analysis of Melittis melissophyllum L. / E. Skrzypczak, L. Skrzypczak // Acta Hort. – 1993, Р. 263–267.
Мазур, Т.В. Регуляция ростовых процессов каллусной культуры представителей семейства Lamiaceae / Т.В. Мазур [и др.] // Интродукция, сохранение и использование биологического разнообразия мировой флоры: материалы Междунар. конф., посвящ. 80-летию ЦБС НАН Беларуси, Минск,19–22 июня 2012 г.: в 2 ч. / НАН Беларуси, ЦБС НАН Беларуси; редкол.: В.В. Титок [и др.]. – Минск, 2012. – Ч.2. – С. 419-423.
Skrzypczak-Pietraszek, E. Polysaccharides from Melittis melissophyllum L. herb and callus / E. Skrzypczak-Pietraszek, A. Hensel // Pharmazie. – 2000. – Vol. 55. – Р. 768–771.
Бердичевец, Л.Г. Микроклональное размножение кадила сарматского / Л.Г. Бердичевец [и др.] // Ботанические сады: состояние и перспективы сохранения, изучения, использования биологического разнообразия растительного мира: тез. докл. Междунар. науч. конф. г. Минск, 30–31 мая 2002 г. / Центральный Ботанический сад НАН Беларуси. – Минск : БГПУ, 2002. – С. 18.
Trigiano, R.N. Plant Development and Biotechnology / R.N. Trigiano, D.J. Gray. – CRC Press LLC, 2005. – 358 р.
Цыренов, В.Ж. Основы биотехнологии: культивирование изолированных клеток и тканей растений Часть 2 / В.Ж. Цыренов // Восточно-сибирский ГТУ. Улан–Удэ. – 2003 – 276 с.
Калинин, Ф.Л., Кушнир Г.П., Сарнацкая В.В. Технология микроклонального размножения растений / Ф.Л. Калинин, Г.П. Кушнир, В.В.. Сарнацкая // К.: Наук. Думка. – 1992. – 228 с.
Skala, E. In vitro regeneration of Salvia nemorosa L. From shoot tips and leaf explants / E. Skala, H. Wysokinska // In Vitro Cell. Dev. Biol. Plant. – 2004. – Vol. 6. – P. 596–602.
Andrade, L.B. The effect of growth regulators on shoot propagation and rooting of common lavender (Lavandula vera DC) / L.B. Andrade [et al.] // Plant Cell, Tissue Organ Cult. – 1999. – 56, Vol. 2. – P. 79–83.
Avato, А. Glandular hairs and essential oils in micropropagated plants of Salvia officinalis L. / P. Avato [et al.] // Plant Science. – 2005. – 169. – Р. 29-36.
